目前，car-t细胞产品尚无统一的技术标准。由于每个制造商在car设计，基因导入，细胞培养和细胞纯化技术方面存在差异，因此car-t细胞的质量控制应考虑特定的生产过程和产品特性。car-t细胞的生产过程应满足当前良好生产规范（cgmp）的要求。cgmp的目的是提供一个框架，以确保由训练有素且经过定期培训的人员在受良好控制的设施和设备中进行高质量的生产，同时需要广泛的系统来记录操作的所有方面，以证明持续的合规性。car-t细胞产品的质量控制应基于相关指南并全面考虑产品作为生物产品，细胞产品和基因疗法产品的特性，包括质量，安全性和有效性的全面测试。car-t细胞作为一种活泼的“药物”，其制备过程复杂，需要进行全过程质量控制。
car-t细胞的质量控制应包括对生产中使用的材料的检查，过程控制以及成品的释放测试。应分别设置相应的测试项目及其可接受的标准。此外，生产过程验证和稳定性研究对于car-t细胞产品至关重要。
1、生产材料控制
car-t细胞的生产材料是用于制备细胞治疗产品的物质或材料，包括细胞、基因修饰载体、培养基、细胞因子、各种添加剂成分、冻存液、辅料等。生产所用的材料与产品的质量直接相关。因此，研究人员应为生产材料建立良好且标准化的质量管理体系，包括对其使用进行风险评估，供应商审核和质量测试。
如果t细胞是由异体供体提供的，则供体细胞的来源应符合相关国家法律，法规和道德规范的要求。供体细胞的采集、运输、分类、测试和保存程序应进行充分研究和验证。在此基础上，应针对供体细胞的特性、培养条件、生成、生长特性、保存状态、保存条件和质量检测等方面制定明确的规格和要求。
原则上，如果可行，应建立细胞库以保存和生产供体细胞。细胞库的层级将取决于对细胞特征，生产和临床应用的充分考虑。应建立细胞库测试标准，并应满足安全性，质量可控性和/或功效的基本要求。
自体供体不需要资格，病原体的筛选和测试是建议性的，但不是强制性的。
生产过程中使用的细胞，例如用于生产病毒载体的细胞，应满足某些基本要求：清晰的来源和培养历史，可控的安全风险，生产过程中足够的质量以及管理良好的细胞库[18,19] 。
目前，car-t细胞生产中的基因修饰主要通过病毒载体（逆转录病毒载体或慢病毒载体），转座子系统或直接的mrna电穿孔来实现，从而使cars在t细胞表面依次表达。特异性识别并结合肿瘤细胞表面的抗原，最终杀死肿瘤细胞。尽管用于基因修饰的载体似乎是car-t细胞生产过程中的原材料，但它实际上已作为最终产物的一部分进入人体。
生产car-t细胞时使用的每种物质，例如培养基、血清、细胞因子、酶、抗体、抗生素和磁珠等，都应明确定义并评估其适用性。为了证明质量[20]，应该测试其特性，包括纯度、细菌内毒素、无菌性、不定因子和生物活性。
建议使用尽可能简单的培养基，并避免使用人或动物来源的成分或可能引起过敏的药物，例如β-内酰胺类抗生素。如果使用商业介质，则供应商应具有资格，并应提供有关成分的信息以及相关的质量证明。除特殊情况外，在t细胞培养中应尽可能避免使用人或动物来源的血清，并且必须禁止使用同种异体的人血清或血浆。如果不可避免地要使用动物血清，则必须确保它不含特定的动物病毒污染。必须严格禁止使用海绵状脑病流行地区的牛血清。如果培养基中包含人血来源的成分，例如白蛋白，转铁蛋白和各种细胞因子，则必须弄清来源，批号和质量认证报告，并使用经监管机构批准用于临床的产品。细胞治疗产品中的成分应符合药物赋形剂的相关要求，应优先考虑那些已批准用于人类的成分；否则，必须进行全面的研究和评估。
2、过程中的控制和测试
在生产car-t细胞期间应进行过程中的控制和测试。过程控制监控生产过程；这包括监视过程参数和实现过程控制的目标。在充分了解整个过程和生产的累积经验的基础上，研究人员应阐明过程控制中的关键生产步骤并定义敏感参数的限制，以避免过程偏差。进行中的测试可监控制备过程中细胞的质量；这涉及在关键步骤或中间产品级别测试产品的关键质量属性。通过建立过程中测试的测试方法和验收标准，并结合最终产品的发布测试，可以对car-t细胞的整个过程和产品质量进行控制，以确保生产过程的可重复性最终产品的批次间一致性[21,22]。
3、放行测试
在发布car-t细胞产品之前，必须进行适当的测试以确保产品符合指定的发布标准。释放标准的基本原则是必须进行足够的测试，以确保产品的特性，纯度，安全性和有效性符合要求。电池产品的这些特性应通过各种方法进行测试，只有合格并通过认证的产品才可以发布。应当提供一份证书，其中概述了已使用的测试方法，相应的测试结果以及可接受的范围。在发布测试中使用的方法应该得到充分的研究和验证。综合验证是必要的，特别是对于新方法。对于药典中包含的方法，需要验证其适用性。当由于产品的保质期短而无法进行完整的质量控制测试程序时，可以执行简化的发布测试程序。在这种情况下，应该明确描述和解释简化发布测试程序的原因；更重要的是，必须通过合理的过程中测试和更广泛的过程验证来适当补充发布所缺少的信息。
car-t细胞的质量控制测试项目应基于产品质量研究以及对生产过程和临床适应症的充分理解，同时考虑到产品的特性以及当前的科学理解和共识。随着该领域（从临床前阶段到临床阶段）研究的不断深入，可以逐步积累与过程相关的信息，并应逐步改进测试方法以满足临床各个开发阶段的质量控制要求。建议用于验证性临床试验的样品的质量控制要求应与市售产品一致。质量控制项目通常应包括产品标识，生物学功效，纯度，杂质，细胞数（即活细胞数，功能细胞数等）和常规检测（例如无菌，支原体，内毒素和外观）[23]。建立验收标准应基于临床前研究，临床研究和验证试验中所有批次的测试数据以及其他相关数据（例如稳定性研究，文献报告和经验）。
4、生产过程验证
对于car-t细胞产品制备的整个过程，需要对多个连续批次（至少三个批次）的生产进行全面的过程表征和过程验证。在此基础上，应建立适当的过程参数和质量标准，以确保对每个过程的有效控制。对于过程验证批次，应比常规批次更广泛地测试，分析和标识中间产品和成品，从而为建立过程项目中的测试项目和质量标准以及常规批次的发布测试提供基础 [24]。
5、稳定性研究
在car-t细胞产品的生产和使用过程中，受到良好控制的冷链运输和储存在确保细胞产品的质量以及防止细菌和支原体污染发生方面起着重要的作用。对于在生产过程中需要暂时保存的样品，需要进行稳定性研究以验证其保存条件和保存期限。car-t细胞产品稳定性研究的基本原理可以参考一般生物产品的相关要求。应根据产品特性，临床使用需要以及保存，包装和运输的特定条件设计合理的研究方法。以冷冻细胞产品为例，有必要在模拟情况下（例如细胞）进行冷冻和解冻研究。恢复过程）。建议研究项目包括细胞特性，生物学效能，细胞纯度，活细胞数量和比例，细胞计数以及与安全性相关的测试[25]。
本文摘自---药精通 bio